新的肝细胞生长因子HPPCn的表达、纯化及体外活性检测

• 作者: 吴祖泽 崔春萍 张达矜 张霄翔 杜劭君 魏苹
• 来源期刊: 中国生物工程杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: HPPCn 原核表达 阴离子交换层析 肝癌细胞系增殖
• 年，卷（期）: 2007,（10）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 6-11
• 页数: 6页
• 分类号: Q789
• 字数: 3931字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-8135.2007.10.002

摘要

目的:建立rhHPPCn在大肠杆菌中的表达体系,纯化表达产物并检测其体外生物活性.方法:以pUC18-HPPCn为模板,构建原核表达载体pET-24a(+)-HPPCn,转化到大肠杆菌BL21中并诱导表达目标蛋白,离子交换色谱法纯化目标蛋白,Western blot分析其免疫原性,MTT法和3H-TdR掺入法检测其体外活性.结果:成功构建出原核表达载体pET-24a(+)-HPPCn,并诱导使目标蛋白的表达量较高,表达产物中HPPCn 23%以可溶形式存在,两步离子交换后可得纯度为94.2%,Western blot鉴定为目的蛋白,MTT法和3H-TdR掺入法检测其具有明显的促肝癌细胞系增殖活性.结论:成功构建出原核表达载体并实现了目标蛋白高表达,两步离子交换法纯化出所需纯度的蛋白,并验证了其较强的体外促肝癌细胞系增殖活性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吴祖泽	军事医学科学院辐射与放射医学研究所	153	1469	18.0	31.0
2	崔春萍	军事医学科学院辐射与放射医学研究所	16	104	5.0	9.0
3	张霄翔	合肥工业大学化学工程学院	22	139	7.0	10.0
4	张达矜	军事医学科学院辐射与放射医学研究所	6	25	3.0	4.0
5	杜劭君	军事医学科学院辐射与放射医学研究所	3	11	2.0	3.0
6	魏苹	合肥工业大学化学工程学院	1	3	1.0	1.0