人重组caspase-6融合蛋白对骨肉瘤SOSP-9607细胞靶向促凋亡作用

• 作者: 任民 周勇 周本根 杨安钢 杨彤涛 纪振钢 苟永胜 范清宇 裘秀春 许彦鸣
• 来源期刊: 中国肿瘤生物治疗杂志
• 学科: 医学
• 关键词: caspase-6 Her 2 融合蛋白 骨肉瘤 细胞凋亡
• 年，卷（期）: 2007,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 21-25
• 页数: 5页
• 分类号: R73
• 字数: 3209字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3872/j.issn.1007-385X.2007.01.005

摘要

目的:探讨Her 2靶向重组的caspase-6融合蛋白对骨肉瘤SOSP-9607细胞的促凋亡作用.方法: 将抗Her 2单链抗体基因e23sFv与绿脓杆菌外毒素PE的转膜结构域基因(PEⅡ)和活性caspase-6 基因连接,构建成Immunocasp-6(e23sFv-PEⅡ-casp-6)基因,将其克隆入真核表达载体pCMV中,转染SOSP-9607细胞,间接免疫荧光法检测目的基因表达和细胞形态学变化,通过Annexin V染色、流式细胞术、MTT法检测来观察其促肿瘤细胞凋亡的作用.结果:转染SOSP-9607细胞后,间接免疫荧光染色检测出caspase-6的表达,SOSP-9607细胞出现明显的核浓缩、碎裂;电镜观察到细胞质浓缩,胞内空泡,核染色质浓集等典型的凋亡特征;MTT法检测发现细胞的增殖明显被抑制;Annexin V染色流式细胞术检测可见明显的凋亡细胞,凋亡率为31.4%,较对照组细胞(凋亡率为6.0%)有非常显著的增加(P＜0.01). 结论: 重组Immunocasp-6基因可以在转染的SOSP-9607细胞中表达,并诱导细胞发生凋亡.