实时定量PCR检测SiRNA对SMMC-7721细胞中MK基因表达的抑制作用

• 作者: 陈功星
• 来源期刊: 杭州师范学院学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 实时定量PCR 小干扰RNA
• 年，卷（期）: 2007,（6）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 353-356
• 页数: 4页
• 分类号: R34
• 字数: 2062字
• 语种: 中文

摘要

目的 通过实时定量PCR(Real-Time PCR)检测基因表达的mRNA,建立一种直接观察小干扰RNA(SiRNA)抑制目的基因表达的方法.方法 化学设计合成对应于中期因子(midkine,MK)基因表达mRNA的SiRNA,经脂质体转染肝癌细胞株SMMC-7721,一定时间后,提取总RNA,逆转录cDNA,然后用实时定量PCR方法,以3-磷酸甘油醛脱氢酶(glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase;GAPDH)为内参照定量MK的表达,比较不同组中MK基因mRNA的量.结果 3种SiRNA处理的SMMC-7721细胞中MK基因的表达mRNA明显降低(P＜0.01).结论 实时定量PCR方法直接、简便、精确地反映了SiRNA对目的基因表达的抑制作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈功星	杭州师范大学医学实验中心	28	42	4.0	5.0