限制性内切酶指纹-高效毛细管电泳激光诱导荧光法测定原核/真核质粒

• 作者: 张强 徐娟 敖燕 王荣 谢华 贾正平 贾海 阮金秀 陈巧云
• 来源期刊: 分析化学
• 学科: 化学
• 关键词: 高效毛细管电泳 限制性内切酶 原核/真核质粒 激光诱导荧光
• 年，卷（期）: 2007,（8）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 1137-1141
• 页数: 5页
• 分类号: O6
• 字数: 4064字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0253-3820.2007.08.010

摘要

采用线性聚丙烯酰胺修饰石英毛细管的高效毛细管电泳无胶筛分技术,对原核/真核质粒用不同限制性内切酶酶切,运用限制性内切酶指纹-高效毛细管电泳激光诱导荧光(REF-HPCE-LIF)检测法同时对内切酶酶切后多个和较长DNA片段进行了检测,电泳缓冲液为1×TBE(pH 8.3),阴极电压进样(10 kV,5 s),分离电压13 kV,25℃,激光诱导荧光检测器检测(λex=520 nm).结果表明,所建立的REF-HPCE-LIF方法可对原核/真核酶切后多个和较长DNA片段进行检测,获得了满意的限制性内切酶指纹图谱,能够检测片段大小相差不超过10 bp.所建立的方法较琼脂糖电泳分辨率高,可应用在检测多个和较长DNA片段的突变,在诊断肿瘤方面有一定应用前景.