多药耐药阴沟肠杆菌临床株ampC基因的克隆和表达

• 作者: 佘丹阳 刘又宁
• 来源期刊: 中华老年多器官疾病杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 肠杆菌,阴沟 β-内酰胺酶类 克隆 基因
• 年，卷（期）: 2007,（5）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 329-333
• 页数: 5页
• 分类号: R3
• 字数: 4048字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-5403.2007.05.011

摘要

目的 克隆一株临床分离的多药耐药阴沟肠杆菌的ampC基因,并研究其编码的AmpCβ-内酰胺酶的特性.方法 聚合酶链反应(PCR)扩增阴沟肠杆菌ECLC074的ampC 基因,将扩增的目标片段连接入pMD18-T 进行双链测序后,进一步克隆入pACYC184质粒,用获得的pACYC184/ampC重组质粒转化大肠杆菌MC4100.采用琼脂稀释法测定阴沟肠杆菌ECLC074, 大肠杆菌 MC4100 及大肠杆菌 MC4100重组菌的抗生素敏感性, 采用三维试验及等电聚焦电泳研究β-内酰胺酶的特性.结果 DNA测序及限制性酶切分析结果表明,阴沟肠杆菌ECLC074的ampC 基因已被克隆入pACYC184质粒,大肠杆菌 MC4100重组菌和阴沟肠杆菌ECLC074均产生一种等电点为7.8的β-内酰胺酶,该酶具有AmpCβ-内酰胺酶的耐药表型特征.结论 阴沟肠杆菌的ampC基因可以被克隆入pACYC184质粒,并能在大肠杆菌 MC4100中表达,这为深入研究染色体AmpCβ-内酰胺酶创造了条件.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	佘丹阳	解放军总医院呼吸科	60	649	14.0	23.0
2	刘又宁	解放军总医院呼吸科	367	2196	23.0	32.0