人胚胎成纤维细胞的分离、培养和鉴定及人胚胎生殖细胞体外生长所需细胞因子的表达

• 作者: 何津 李玉林 王英
• 来源期刊: 吉林大学学报（医学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 人胚胎成纤维细胞 人胚胎生殖细胞 细胞培养
• 年，卷（期）: 2007,（2）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 245-248
• 页数: 4页
• 分类号: Q813.11
• 字数: 2303字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-587X.2007.02.014

摘要

目的:从人胚胎生殖腺嵴和肠背系膜中分离、培养及鉴定人胚胎成纤维细胞(hEFs),检测hEFs表达人胚胎生殖细胞(hEG)体外生长所需的重要细胞因子.方法:利用酶消化法从孕5～9周龄人胚胎的生殖腺嵴和肠背系膜中分离培养hEFs,检测其生物学特性(细胞形态、细胞生长特点、细胞周期).采用逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)检测hEFs表达成纤维细胞特异性标志(脯氨酰4-羟化酶β亚单位)和上皮细胞特异性标志(细胞角蛋白4)的情况,对该细胞进行鉴定.应用RT-PCR检测hEG生长所需的重要细胞因子的表达,即碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和白血病抑制因子(LIF).结果:从人胚胎生殖腺嵴和肠背系膜中成功地分离培养出hEFs,该细胞可传25代以上,且经过传代及冻存复苏后生物学特性无改变;hEFs表达脯氨酰4-羟化酶β亚单位,不表达细胞角蛋白4,确定其为成纤维细胞;该成纤维细胞表达bFGF和LIF.结论:成功地分离和培养了人胚胎生殖腺嵴和肠背系膜来源的成纤维细胞,证明其表达对于hEG体外生长起重要作用的细胞因子.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李玉林	吉林大学基础医学院病理生物学教育部重点实验室	175	846	13.0	18.0
2	何津	吉林大学基础医学院病理生物学教育部重点实验室	48	470	12.0	20.0
6	王英	吉林大学基础医学院病理生物学教育部重点实验室	99	713	15.0	23.0