人脐带Wharton胶中间充质干细胞向软骨诱导的实验研究

• 作者: 侯克东 卢世璧 孙明学 张莉 彭江 眭翔 袁玫 许文静 赵斌 郭全义
• 来源期刊: 中华骨科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 脐带 间质干细胞 软骨
• 年，卷（期）: 2007,（12）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 930-935
• 页数: 6页
• 分类号: R6
• 字数: 4669字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j.issn:0253-2352.2007.12.014

摘要

目的 研究人脐带Wharton胶中间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)向软骨诱导分化的特性.方法 去除新鲜人脐带动、静脉和外膜组织,获得Wharton胶并剪碎,胶原酶消化法进行原代培养.经传代培养、流式细胞检测表面标志、克隆形成率测定后,用软骨诱导培养液使MSCs向软骨细胞分化,并以组织化学和免疫组织化学染色进行鉴定.逆转录聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)检测软骨特征性标志.结果 人脐带Wharton胶富含干细胞,采用酶消化法可快速分离培养原代细胞.流式细胞检测表明这些细胞不表达造血干细胞标志,表达CD44、CD105、CD271等间质干细胞表面标志;HLA-ABC阳性表达,HLA-DPDQDR阴性表达.不同代MSCs的克隆形成率差异无统计学意义(P＞0.05).未进行软骨诱导的细胞弱表达软骨细胞标志,经软骨诱导分化后,组织化学和免疫组织化学检测表明其能够较好地表达软骨细胞标志.RT-PCR结果显示人脐带Wharton胶中MSCs诱导前后均表达Sox-9、Col-2A1.结论 人脐带Wharton胶中MSCs来源广泛,无伦理学限制;且具有前软骨细胞的特性,有望成为软骨组织工程新型的种子细胞.