空肠弯曲菌活而不可培养状态的产毒素能力及毒素基因表达的检测

• 作者: 吴仲梁 杨捷琳 窦同海 顾鸣
• 来源期刊: 微生物与感染
• 学科: 医学
• 关键词: 空肠弯曲菌 活的不可培养状态 细胞检测 肠毒素
• 年，卷（期）: 2007,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 34-38
• 页数: 5页
• 分类号: R4
• 字数: 4174字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-6184.2007.01.008

摘要

目的 通过诱导空肠弯曲菌进入活的不可培养(VBNC)状态建立细胞学模型,用VeroE6细胞和HeLa细胞检测空肠弯曲菌产细胞膨胀性肠毒素(cytotoxic distending toxin,CDT)能力的改变,并在RNA水平上进一步验证毒素的表达.方法 采用4℃冷藏及-70℃冷冻的方法诱导空肠弯曲茵进入VBNC状态,利用细胞总数计算、活细胞染色计数及可培养细胞计数间接确证VBNC状态细菌的存在,细胞对于VBNC状态下的细菌仍然敏感,并用反转录.聚合酶链反应(RT-PCR)证实空肠弯曲菌毒素基因的表达.结果 3种不同状态的细胞计数结果表明存活细胞进入了VBNC状态,细菌经4℃冷藏及-70℃冷冻后数量减少约1个数量级,在冷冻前,细菌对细胞毒性较强,72h时70%以上细胞凋亡,冷冻后的VBNC状态细菌对VeroE6和HeLa细胞的生长仍有影响,72h时约有40%细胞进入凋亡状态.结论 低温、贫养条件下空肠弯曲菌可进入VBNC状态,用常规传统的羊血平板培养基仅能使不到10%的空肠弯曲菌复苏生长,从而可以检测,在VBNC状态时,空肠弯曲菌产毒素能力改变较大,远远低于正常状态,但仍具备产毒素的能力,也从RNA水平实验得到证实.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨捷琳	上海出入境检验检疫局食品中心	33	146	7.0	10.0
2	顾鸣	上海出入境检验检疫局食品中心	33	239	8.0	14.0
3	窦同海	复旦大学遗传学研究所	13	35	4.0	5.0
4	吴仲梁		1	5	1.0	1.0