骨髓基质干细胞-196℃保存的初步研究

• 作者: 刘雪梅 文益民 葛宝丰 蓝旭
• 来源期刊: 口腔颌面外科杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 骨髓基质干细胞 培养 冻存 二甲亚砜
• 年，卷（期）: 2007,（4）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 316-319
• 页数: 4页
• 分类号: Q813
• 字数: 3579字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-4979.2007.04.006

摘要

目的:探索适合于人骨髓基质干细胞(marrow stromal cells,MSCs)-196℃冷冻保存的条件和方法.方法:体外分离培养人MSCs,以含不同浓度二甲亚砜(dimethylsulfoxide,DMSO)的冻存液和不同浓度的细胞在液氮中保存.3个月后复苏接种培养,观察细胞形态、存活率和贴壁率;通过3H-胸腺嘧啶脱氧核苷(3H-TdR)掺入实验比较细胞分裂增殖能力;3H-脯氨酸(3H-Proline)掺人实验检测胶原合成能力:RT-PCR法检测Ⅰ型胶原和骨钙素(osteocalcin,OC)mRNA表达.结果:不同DMSO浓度保存MSCs复苏后的细胞形态和功能有所不同,其中含5%DMSO冻存液组保存效果最差,15%组最佳.15%DMSO冻存液组复苏后MSCs的形态与未冻存组相似,存活率为(86±5)%,贴壁率为(82±3)%.MSCs保持较强的分裂增殖和胶原合成能力,Ⅰ型胶原和骨钙素mRNA表达与5%或10%DMSO冻存液组比较有显著性差异(P＜0.05).冻存MSCs浓度为(5～10)×106个/mL组复苏后细胞存活率明显优于(1～2.5)×106个/mL组.结论:含15%DMSO的冻存液适合于MSCs长期保存,高浓度组MSCs冻存效果优于低浓度组.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	文益民	解放军兰州军区总医院脊柱外科	22	61	5.0	6.0
2	蓝旭	解放军兰州军区总医院脊柱外科	34	98	5.0	7.0
3	葛宝丰	解放军兰州军区总医院脊柱外科	46	181	7.0	10.0
4	刘雪梅	解放军兰州军区总医院脊柱外科	21	55	4.0	6.0