树形分子递送survivin反义寡核苷酸对HepG2细胞的抑制效应

• 作者: 刘凤涛 崔大祥 徐萍 李清 潘碧峰 贺蓉 陈浩 高峰 鲍晨晨 黄拓
• 来源期刊: 中国肿瘤生物治疗杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 纳米材料 树形分子 survivin基因 反义寡核苷酸 肝癌细胞 基因治疗
• 年，卷（期）: 2007,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 411-416
• 页数: 6页
• 分类号: R730.54
• 字数: 3988字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3872/j.issn.1007-385X.2007.05.003

摘要

目的: 研究利用聚酰胺(polyamidoamine, PAMAM)树形分子递送survivin基因反义寡核苷酸(antisense oligodeoxy-nucleotide, asODN)抑制人肝癌细胞株HepG2细胞增殖的效应.方法: 采用第1至第5代的聚酰胺树形分子室温下与反义survivin寡核苷酸混合制备树形分子与反义寡核苷酸的复合物(PAMAM-asODN),应用琼脂糖凝胶电泳及原子力学显微镜观察复合物的形态结构.PAMAM-asODN复合物转染HepG2细胞,同时设survivin反义寡核苷酸转染细胞作对照.共聚焦荧光显微镜检测复合物细胞转染效果;RT-PCR分析转染后细胞survivin mRNA的表达水平;MTT法检测复合物对HepG2细胞增殖的抑制效应.结果: 琼脂糖凝胶电泳分析表明,树形分子与survivin反义寡核苷酸具有高效络合作用,形成了大小为25 nm左右的复合物;共聚焦荧光显微镜检测显示,与对照相比,PAMAM-asODN复合物转染细胞的效率显著提高;RT-PCR的结果表明,转染PAMAM-asODN复合物的肿瘤细胞中survivin mRNA表达显著降低;MTT结果表明,树形分子递送survivin反义寡核苷酸进入细胞后,HepG2细胞增殖明显受抑制,增殖抑制率随培养时间、复合物浓度、树形分子代数的增加而增加,6.0 μmol/L G4.0 PAMAM-asODN与细胞培养96 h可使抑制率达55%以上.结论: PAMAM树形分子能高效递送survivin asODN进入细胞,并抑制HepG2肿瘤细胞的增殖.树形分子可能是一种高效基因药物递送载体,在肿瘤治疗中具有潜在应用价值.