检测兽用疫苗中支原体污染的PCR-ELISA技术的建立及应用

• 作者: 刘晋平 姜俊兵 张映 贾丽艳
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 学科: 农学
• 关键词: 兽用疫苗 支原体 PCR-ELISA 检测
• 年，卷（期）: 2007,（1）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 102-106
• 页数: 5页
• 分类号: S188
• 字数: 3609字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2007.01.021

摘要

建立了检测兽用疫苗中支原体污染的PCR-ELISA方法,探索其最佳实验条件及优化组合.实验依据GenBank中登录的鸡源支原体和猪源支原体16S rRNA基因序列(登录号:Mg,AY744942;Mhp,AE017244;Mbs,AY973563;Mf,X63377),运用DNAStar软件和Primer 5.0软件设计PCR特异性引物和探针,其中引物用地高辛标记,探针用生物素标记.以培养的支原体中提取的DNA为模板,依据PCR-ELISA技术原理设计实验,建立并优化PCR-ELISA反应条件.对30批鸡新城疫Ⅰ系活疫苗、30批鸡新城疫La Sota系活疫苗样品和30批猪瘟活疫苗样品进行检测.结果表明,应用建立的PCR-ELISA反应体系和条件可以从疫苗样品中检测到支原体,检测率为35.6%,比PCR法的检测率高11.2%.该方法灵敏度高,特异性强,在疫苗的支原体污染检测中具有推广应用价值.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张映	山西农业大学动物科技学院	99	842	13.0	24.0
2	姜俊兵	山西农业大学动物科技学院	51	333	10.0	16.0
3	贾丽艳	山西农业大学动物科技学院	24	116	7.0	10.0
4	刘晋平	山西农业大学动物科技学院	16	92	5.0	9.0