组成型天冬氨酸转氨酶基因工程菌的构建与高效表达

• 作者: 何冰芳 宫长斌 徐娴 李霜
• 来源期刊: 过程工程学报
• 学科: 工学
• 关键词: 组成型表达 天冬氨酸转氨酶基因 天冬氨酸转氨酶 L-苯丙氨酸 磷酸吡哆醛
• 年，卷（期）: 2007,（3）
• 所属期刊栏目: 生化工程专栏
• 页码范围: 574-578
• 页数: 5页
• 分类号: TQ92
• 字数: 4135字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1009-606X.2007.03.028

摘要

天冬氨酸转氨酶AspAT、是苯丙酮酸转氨制备L-苯丙氨酸的关键酶.本研究将大肠杆菌中天冬氨酸转氨酶基因aspC克隆到3种不同质粒中,构建组成型表达质粒pUC/P-aspC,pSE/P-aspC,pET/P-aspC,并分别转化至6种常用的大肠杆菌宿主中.通过对18种重组子的生长及产酶情况的分析,比较了各种重组子生长压力、质粒稳定性与表达酶活的关系,并经SDS-PAGE电泳分析AspAT的表达量,筛选出高产AspAT的重组子BL21(pET/P-aspC),以该工程菌发酵液直接作为酶液,以天冬氨酸和苯丙酮酸(20g/L)为底物,发酵液与底物以1:3的体积比转化生成L-苯丙氨酸16.2 g/L,转化率高达80.1%.该体系表达无需诱导,转化无需添加辅酶PLP,展现了良好的产业化前景.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李霜	南京工业大学制药与生命科学学院	87	705	13.0	22.0
2	何冰芳	南京工业大学制药与生命科学学院	91	785	14.0	24.0
3	徐娴	南京工业大学制药与生命科学学院	11	66	5.0	8.0
4	宫长斌	南京工业大学制药与生命科学学院	2	14	2.0	2.0