青枯雷尔氏菌龙胆酸1,2-双加氧酶基因的克隆、表达和酶性质的研究

• 作者: 倪晋仁 刘冬啟 朱顺妮
• 来源期刊: 北京大学学报（自然科学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 青枯雷尔氏菌 GMI1000菌株 龙胆酸1,2-双加氧酶 酶性质
• 年，卷（期）: 2007,（6）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 828-833
• 页数: 6页
• 分类号: Q55
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0479-8023.2007.06.016

摘要

本研究克隆、表达了青枯雷尔氏菌GMI1000菌株中编码龙胆酸1,2-双加氧酶的基因, 并通过亲和层析对该酶进行了纯化, SDS-PAGE结果表明该酶亚基约为38kDa.该酶的最适反应温度和最适pH分别为30℃和7.5.该酶的Km为56μmol/L,pI为4.6～4.8.纯化后的龙胆酸1,2-双加氧高度不稳定:4℃下放置72h即失去85%的酶活. 甘油和β-巯基乙醇可稳定该酶酶活,在添加10%(体积比)甘油至酶液(50mmol/L, pH 7.3的磷酸盐缓冲液保存)后,-20℃保藏2周后均能检出明显的酶活.0.1～1mmol/L Fe2+可以激活或者稳定该酶的酶活.Na+,K+,Mg2+和Ca2+(分别为1～2mmol/L)对该酶的酶活无明显的影响.Mn2+,Zn2+和Fe3+的添加量超过2mmol/L时,酶活急剧下降.1mmol/L的Cu2+即使该酶失去酶活.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	倪晋仁	北京大学环境工程系	150	3799	34.0	52.0
2	朱顺妮	北京大学环境工程系	2	41	1.0	2.0
3	刘冬啟	北京大学环境工程系	2	0	0.0	0.0