人重组Fas配体体外诱导细胞周期特异性凋亡模型的建立

• 作者: 何小军 徐惠婷 李小兰 王尊 肖徽 肖田 葛军娜 陶德定 黄丹 龚建平
• 来源期刊: 华中科技大学学报（医学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 人重组Fas配体 细胞周期 细胞凋亡 流式细胞术
• 年，卷（期）: 2007,（3）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 385-388
• 页数: 4页
• 分类号: Q781
• 字数: 3166字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3870/j.issn.1672-0741.2007.03.029

摘要

目的 运用人重组Fas配体(rhFasL),体外诱导稳定而又典型的Fas介导的细胞周期特异性凋亡模型,为针对其细胞凋亡过程中的细胞周期机制研究、肿瘤的生物学治疗和自身免疫性疾病的防治等提供科学的研究平台.方法 以白血病细胞系(Molt-4和Jurkat细胞系)和进入细胞周期的外周血淋巴细胞为载体,用人重组Fas配体诱导细胞6～36 h后,用亚G1峰法、传统的AnnexinV/PI和改良后的API法进行标记并用流式细胞术检测细胞凋亡情况.结果 改良后的API法显示人重组Fas配体诱导的细胞凋亡具有细胞周期特异性及始动位点;传统的AnnexinV/PI显示在将细胞凋亡控制在10%～20%并以早期细胞凋亡为主时诱导的模型最典型;亚G1峰法只能检测晚期细胞凋亡和进行DNA直方图分析.结论 人重组Fas配体体外诱导的细胞凋亡具有细胞周期特异性并始动于G1期,联合应用传统的Annexin-V/PI及改良后的API法能为建立稳定而又典型的体外Fas介导的细胞周期特异性凋亡模型提供技术支撑.