生育酚结合蛋白通过磷酸肌醇3激酶途径抑制前列腺癌的生长

• 作者: 周祥福 李小娟 温星桥 温机灵 王林 罗云 蔡育彬 高新
• 来源期刊: 中山大学学报（医学科学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 生育酚结合蛋白 前列腺癌 磷酸肌醇3激酶
• 年，卷（期）: 2007,（4）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 367-372
• 页数: 6页
• 分类号: R697.31
• 字数: 3254字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1672-3554.2007.04.002

摘要

[目的]探讨生育酚结合蛋白(TAP)对前列腺癌细胞的生长调节及其分子机制.[方法]四甲基偶氮唑盐生长试验(MTT)测定细胞增殖情况,体外集落形成试验测定各细胞的致癌能力,高效液相层析法检测细胞内维生素E的浓度,利用基因转染、基因沉默、免疫印迹、Northern blot,RT-PCR、荧光定量PCR、免疫沉淀等方法研究TAP对前列腺细胞生长的作用及机制.[结果]TAP mRNA水平在前列腺癌细胞LNCaP、PC-3、DU-145、CWR22R中均较正常前列腺细胞RWPE-1低.TAP可促进癌细胞保留维生素E并增强其抗前列腺癌增殖的效应.无维生素E作用下,转染TAP可抑制前列腺癌细胞LNCaP、DU-145的生长,第6天细胞数比对照组分别减少35.8%与42.4%;LNCaP细胞克隆形成率下降54.3%(P＜0.05).利用siRNA在良性前列腺细胞HPr-1中沉默TAP基因,培养9 d后,细胞数比对照组增加124.3%(P＜0.01).TAP通过抑制磷酸肌醇PI3激酶信号,而非通过影响细胞周期或雄激素受体信号发挥作用.免疫沉淀实验表明TAP通过抑制PI3K的亚单位p110与p85的相互作用,进而干扰PI3K-Akt信号通路;持续激活Akt的活性可削弱TAP对前列腺癌细胞生长的抑制能力.[结论]TAP不仅能促进前列腺癌细胞摄取和增强维生素E的抗前列腺癌效应,还可通过非维生素E途径发挥作用,可能是防治前列腺癌的有价值的分子靶点.