猪附红细胞体PCR-微孔板杂交-酶免疫检测方法的研究

• 作者: 张健騑 张浩吉 王政富 蒲文珺 蔡建平 覃宗华 谢明权 顾万军
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 猪附红细胞体 PCR 微孔板杂交 检测
• 年，卷（期）: 2007,（2）
• 所属期刊栏目: 预防兽医
• 页码范围: 184-189
• 页数: 6页
• 分类号: S854.4|S858.285
• 字数: 4795字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0366-6964.2007.02.014

摘要

以猪附红细胞体和多种血营养菌16S rRNA基因的保守区设计合成引物HM-f/HM-r,在反向引物的5′端用生物素标记,以猪附红细胞体广东株16S rRNA基因的可变区序列设计种特异性寡核苷酸探针,探针的5′端用地高辛标记,成功地建立了猪附红细胞体PCR-微孔板杂交-酶免疫检测方法.通过测定不同浓度PCR产物对应的微孔板杂交-酶反应显色OD值,用SPSS统计软件进行回归分析,得到回归方程为y=2.101 2-0.449 2×logx,其相关系数R为0.977,显示对未知样品可进行定量检测.该方法与猪的多种细菌性病原、猫血巴尔通氏体CA株和E. wenyonii无交叉反应,其敏感性比常规PCR琼脂糖电泳检测提高了近100倍.用建立的方法对38份临床样品进行检测,结果有12份检测结果为阳性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	顾万军	佛山科学技术学院动物医学系	80	641	15.0	22.0
2	覃宗华	广东省农科院兽医研究所	28	338	10.0	17.0
3	张健騑	广东省农科院兽医研究所	30	344	11.0	18.0
4	谢明权	广东省农科院兽医研究所	43	607	15.0	23.0
5	王政富	佛山科学技术学院动物医学系	23	115	5.0	10.0
6	蔡建平	广东省农科院兽医研究所	35	522	13.0	22.0
7	蒲文珺	佛山科学技术学院动物医学系	22	105	6.0	8.0
8	张浩吉	佛山科学技术学院动物医学系	23	186	5.0	13.0