猪附红细胞体半巢式PCR诊断方法的建立

• 作者: 冯会权 尤立娜 巴彩凤 廉长红 李慧平 林小丰 王凯 石蕾
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 医学
• 关键词: 猪附红细胞体 半巢式聚合酶链反应 克隆 序列分析
• 年，卷（期）: 2008,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 322-326
• 页数: 5页
• 分类号: R379.9
• 字数: 4034字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2008.04.010

摘要

目的 为能够更加准确、敏感的检测出猪附红细胞体(Mycoplasma suis,M.suis),本试验建立一种新的诊断方法-半巢式聚合酶链反应( hemi-nested Polymerase Chain Reaction ,hemi-nested PCR).方法 利用Oligo 6.0和Primer 5.0软件设计筛选出合适的PCR引物,经酶切分析和半巢式PCR进一步鉴定后进行序列测定.同时与普通PCR诊断方法进行比较.结果 测得的猪附红细胞体基因序列与GenBank中发表的猪附红细胞体基因序列(AJ504999)同源性为100%.特异性试验结果表明本实验设计的PCR引物不能从弓形虫、链球菌、大肠杆菌、猪肺炎支原体和猪伪狂犬病病毒的基因组DNA中扩增出条带.通过敏感性试验,半巢式PCR诊断方法最低能够检测出0.12fg的标准模板DNA.通过与普通PCR比较,证明本试验建立的半巢式PCR更具敏感性和实用性.结论 本试验建立的半巢式PCR诊断方法具有特异、敏感、实用等特点,为猪附红细胞体的检测提供了一种可靠的诊断方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	冯会权	辽宁医学院实验动物中心	14	79	6.0	8.0
2	巴彩凤	辽宁医学院实验动物中心	91	369	10.0	14.0
3	王凯	辽宁医学院实验动物中心	4	6	1.0	2.0
4	尤立娜	辽宁医学院实验动物中心	2	6	1.0	2.0
5	李慧平	辽宁医学院实验动物中心	2	6	1.0	2.0
6	林小丰	辽宁医学院实验动物中心	2	6	1.0	2.0
7	廉长红	辽宁医学院实验动物中心	2	6	1.0	2.0
8	石蕾	辽宁医学院实验动物中心	2	6	1.0	2.0