重组腺相关病毒对大鼠神经干细胞的体外转染及其对细胞生长的影响

• 作者: 刘利 宋武奇 张凤民 李晓波 林志国 沈红 车彦军
• 来源期刊: 中华微生物学和免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 腺相关病毒 绿色荧光蛋白 神经干细胞 转染
• 年，卷（期）: 2007,（4）
• 所属期刊栏目: 病毒学
• 页码范围: 343-348
• 页数: 6页
• 分类号: R3
• 字数: 4120字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j:issn:0254-5101.2007.04.015

摘要

目的 研究重组腺相关病毒(recombinant adeno-associated virus,rAAV)载体对原代培养的神经于细胞(neural stem cells,NSC)的体外转染及其对细胞增殖、分化和迁移能力的影响.方法 取新生24 h内的Wistar大鼠的海马进行神经干细胞原代培养,用不同滴度的rAAV为载体,以增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)基因作为报告基因进行体外转染NSC,通过观察有绿色荧光的Nsc的数量,测定rAAV对NSC的体外转染情况;用MTT法测定不同病毒滴度下rAAV对NSC增殖能力的影响,用免疫组化法鉴定NSC、神经元及神经胶质细胞,并在倒置荧光显微镜下直接测定细胞的迁移距离.结果 rAAV对NSC的体外转染效率随着病毒滴度的增加而提高,在转染后的第11天表达水平最高,用MOI为104、105、106的rAAV转染后第11天的转导率分别是9.81%、56.30%、64.67%;不同滴度rAAV转染NSC后不同时间点的MTT测定A值随着病毒滴度的增加而明显减小,差异均有统计学意义;但不同滴度rAAV转染NSC,其分化为神经元和神经胶质细胞的比率以及迁移的距离未见差异.结论 较高滴度(MOI为105和106)的rAAV可以在体外有效地转染神经干细胞,且不影响神经干细胞的分化和迁移能力,但对其增殖能力有明显抑制,并表现为病毒滴度依赖性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	沈红	哈尔滨医科大学第一附属医院神经外科	34	100	5.0	8.0
2	林志国	哈尔滨医科大学第一附属医院神经外科	79	314	9.0	12.0
3	车彦军	哈尔滨医科大学第一附属医院神经外科	5	21	3.0	4.0
4	刘利	哈尔滨医科大学第一附属医院神经外科	23	85	5.0	7.0