RNAi下调hENT1可增强5-氟尿嘧啶对胰腺癌细胞的毒性

• 作者: 刘胜利 郑杰 陈武强
• 来源期刊: 中国药科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 胰腺癌 核苷转运蛋白 RNA干扰 5-氟尿嘧啶 细胞毒性
• 年，卷（期）: 2007,（4）
• 所属期刊栏目: 论文
• 页码范围: 360-364
• 页数: 5页
• 分类号: R33|R736.7
• 字数: 3884字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-5048.2007.04.017

摘要

目的:运用RNAi技术下调平衡型核苷转运蛋白1(hENT1)的表达,观察hENT1下调后5-氟尿嘧啶(5-FU)对胰腺癌Panc-1细胞的毒性改变情况.方法:设计并合成能表达特异性针对hENT1的shRNA(small hairpin RNA)的DNA序列,构建pSilence-hENT1 4.1-CMV neo质粒.用脂质体法将pSilence-hENT1 4.1-CMV neo质粒转染胰腺癌Panc-1细胞,并以含G418(600 μg/mL)的培养液筛选阳性转染细胞(pSilence-hENT1 4.1-CMV neo Panc-1).RT-PCR检测下调pSilence-hENT1 4.1-CMV neo Panc-1细胞hENT1 mRNA表达的效果及稳定性.MTT法检测细胞在含5-FU(0～1.56×106 nmol/L)的培养液中48 h后的生存率,并计算IC50.结果:测序显示重组质粒pSilence-hENT1 4.1-CMV neo中插入片段序列正确.RT-PCR结果显示,pSilence-hENT1 4.1-CMV neo Panc-1细胞hENT1 mRNA表达水平下调,并在两个月内(共传代15次)保持相对稳定.MTT结果显示,pSilence-hENT1 4.1-CMV neo Panc-1细胞组氟尿嘧啶的IC50显著下降,为Panc-1细胞组IC50的51.52 %(P《0.01).结论:用RNAi 方法下调hENT1 mRNA表达可增强5-FU对胰腺癌细胞的毒性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	郑杰	东南大学基础医学院	53	388	11.0	17.0
2	刘胜利	东南大学附属中大医院普通外科	56	200	8.0	12.0
3	陈武强	东南大学附属中大医院普通外科	1	8	1.0	1.0