下调 hENT1 可抑制胰腺癌细胞株 Sw1990对吉西他滨的跨膜转运

• 作者: 刘胜利 张红刚 徐建敏 费晓庆 鞠煌先
• 来源期刊: 中国药科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: RNA干扰 核苷载体 吉西他滨 毛细管区带电泳 胰腺癌细胞株
• 年，卷（期）: 2008,（5）
• 所属期刊栏目: 论文
• 页码范围: 457-462
• 页数: 6页
• 分类号: R33|R736.3
• 字数: 4353字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-5048.2008.05.014

摘要

目的:明确下调hENT1后对胰腺癌细胞株Sw1990跨膜转运吉西他滨的影响.方法:将能特异性下调hENT1的pSilertce-hENT1 4.1-CMV neo的重组质粒以及对照质粒转染至胰腺癌Sw1990细胞内.采用G418筛选阳性克隆细胞.RT-PCR检测hENT1 mRNA表达情况.培养Sw1990细胞、pSilence-hENTISi-Sw1990、pSilence-Control-Sw1990细胞.3组细胞培养基中吉西他滨质量浓度均为100 ttg/mL,温育0,15,30 min,1,2,4 h后收集细胞.取等量细胞悬液两份各100μL,一份作为检测样本用毛细管区带电泳测定吉西他滨总量,另一份用作平行样本测定总蛋白含量.根据蛋白-细胞数量标准曲线来确定平行样本中细胞数,再用血细胞分析仪确定细胞体积,最后,计算单细胞内药物总量及浓度.结果:pSilence-hENTlSi-Sw1990细胞的hENT1 mRNA表达水平下调50%.Sw1990组用含吉西他滨(100μg/mL)的DMEM培养基温育后,细胞内药物质量浓度在30 min达(55.1±10.4)μg/mL,60 min达(70.2±7.8)p,g/mL,120 min后处于平台期(90.1±6.0)μg/mL.相比之下,pSilence-hENTlSi-Sw1990组细胞内质量药物浓度30 min达(41.3±4.9)μg/mL,60 min达平台期(51.3±11.8)μg/mL,与对照组相比,细胞内浓度处于较低水平(P＜0.05).pSilence-hENTlcontrol-Sw1990组与Sw1990组相比差异无统计学意义(P＞0.05).结论:下调hENTI可以抑制胰腺癌细胞株Sw1990对吉西他滨的摄取,hENTl是吉西他滨跨膜转运的重要通道.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘胜利	东南大学医学院附属中大医院普通外科	56	200	8.0	12.0
2	鞠煌先	南京大学分析化学系	3	17	2.0	3.0
3	张红刚	东南大学医学院附属中大医院普通外科	2	9	2.0	2.0
4	徐建敏	东南大学医学院附属中大医院普通外科	2	9	2.0	2.0
5	费晓庆	南京大学分析化学系	2	9	2.0	2.0