猪链球菌2型四川人源分离株ZYH24细胞外蛋白因子的原核表达及活性分析

• 作者: 唐家琪 潘秀珍 王海丽 王长军 郑峰 陆承平 鞠爱萍
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 细胞外蛋白因子 原核表达 蛋白纯化
• 年，卷（期）: 2007,（3）
• 所属期刊栏目: 兽医免疫学
• 页码范围: 247-250
• 页数: 4页
• 分类号: R392.9
• 字数: 3082字
• 语种: 中文

摘要

目的:克隆、达猪链球菌2型四川人源分离株ZYH24细胞外蛋白因子基因片段,分析蛋白活性.方法:根据GenBank S.suis 2 epf基因序列设计引物,克隆ZYH24株epf 基因片段并进行序列分析;构建原核表达质粒pGEX4T-2-epf,在大肠杆菌中诱导带有谷胱苷肽转移酶(GST)标签的融合蛋白EF-GST的表达;亲和层析法纯化融合蛋白EF-GST,用凝血酶切除重组蛋白中的GST,获得纯化的EF抗原;SDS-PAGE和Western blot分析诱导表达及纯化的重组蛋白.结果:序列分析表明,获得的epf基因片段长895 bp;原核表达的融合蛋白EF-GST分子量约62 000,凝血酶处理后的EF抗原分子量约35 000,两者均可与制备的EF多克隆抗血清发生特异性反应.结论:成功克隆了人源分离株ZYH24 epf基因片段,在原核系统实现高效的功能性表达,为开展EF蛋白的相关研究奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王海丽		3	35	3.0	3.0
2	王长军		134	625	12.0	17.0
3	陆承平	南京农业大学动物医学院	387	5495	37.0	51.0
4	潘秀珍		80	452	10.0	17.0
5	唐家琪		103	711	14.0	22.0
6	郑峰		26	98	6.0	8.0
7	鞠爱萍	南京农业大学动物医学院	1	4	1.0	1.0