2型猪链球菌SspA基因序列及其免疫原性分析

• 作者: 何奇松 冯淑萍 吴军 孙翔翔 熊毅 胡巧云 袁小宁 颜健华 黄胜斌
• 来源期刊: 南方农业学报
• 关键词: 2型猪链球菌 SspA基因 分段表达 免疫原性
• 年，卷（期）: 2015,（7）
• 所属期刊栏目: 畜牧·兽医·水产·蚕桑
• 页码范围: 1310-1314
• 页数: 5页
• 分类号: S858.28
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j:issn.2095-1191.2015.7.1310

摘要

[目的]明确2型猪链球菌的枯草杆菌素样丝氨酸蛋白酶(SspA)基因序列特征及其原核表达重组蛋白的免疫原性,为2型猪链球菌病的诊断及疫苗研究奠定基础.[方法]针对SspA基因上、下游序列分别设计1对引物,从112株2型猪链球菌临床分离株中扩增其相应片段,并进行测序分析;同时以SspA基因的重组质粒pET28a-SspN、pET28a-SspM和pET28a-SspC分别转化感受态大肠杆菌BL21(DE3)后经IPTG诱导表达,再以SDS-PAGE检测融合蛋白表达情况,Western blotting鉴定其免疫原性.[结果]SspA基因上游片段较保守,而下游片段变异区间较大.在IPTG诱导下,含有重组质粒pET28a-SspN、pET28a-SspM和pET28a-SspC的菌株表达出3段融合蛋白,其中,SspN和SspC重组蛋白存在于破碎菌体的上清液中,而SspM重组蛋白以包涵体形式存在于沉淀中,其大小为:SspN重组蛋白66 kD,SspM重组蛋白65 kD,SspC重组蛋白32 kD.Western blotting鉴定结果显示,3段重组蛋白均能与2型猪链球菌感染血清发生反应,且以SspN重组蛋白反应最强烈,而与以全菌灭活苗制备的猪血清未发生特异性反应.[结论]2型猪链球菌SspA基因上游片段较保守,经大肠杆菌重组表达的SspN蛋白免疫原性较强,且具备鉴别2型猪链球菌感染与免疫的潜力,可作为研究猪链球菌病血清学诊断的候选抗原片段.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	黄胜斌		14	62	5.0	7.0
2	熊毅		29	113	6.0	8.0
3	何奇松		10	27	3.0	4.0
4	颜健华		5	20	3.0	4.0
5	胡巧云		3	12	3.0	3.0
6	袁小宁	广西大学生命科学技术学院	3	7	2.0	2.0
7	孙翔翔		1	3	1.0	1.0
8	吴军		1	3	1.0	1.0