不同培养条件对牛精原干细胞增殖的影响与特性鉴定

• 作者: 吕宁 张仕强 张涌 彭树英 毕聪明
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 精原干细胞 SCF LIF GDNF 牛
• 年，卷（期）: 2007,（6）
• 所属期刊栏目: 遗传繁育
• 页码范围: 542-547
• 页数: 6页
• 分类号: S823.2
• 字数: 4798字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0366-6964.2007.06.005

摘要

探索血清浓度以及干细胞因子(SCF)、白血病抑制因子(LIF)、胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)对牛精原干细胞体外增殖的影响,并对其进行鉴定.试验1:以高糖DMEM为基础培养液,添加浓度为0%、2.5%、5%和10%的胎牛血清(Fetal bovine serum,FBS),分为4个试验组.结果表明,血清浓度影响牛精原干细胞的体外增殖,添加2.5%的FBS比较合适.试验2:培养液中加入不同浓度的SCF、LIF及GDNF,可增加精原干细胞的数量,其中加入20 μg/L SCF、80 μg/L GDNF、10 μg/L LIF后,与对照组比较能显著提高精原干细胞数(P＜0.05).采用碱性磷酸酶染色、细胞免疫组织化学染色和RT-PCR对牛精原干细胞进行鉴定,结果碱性磷酸酶染色呈弱阳性;细胞免疫组织化学染色Integrin β1阳性、c-kit阳性;经RT-PCR扩增,获得了120 bp的Gfrα1序列和280 bp的c-kit序列,与预期的产物大小一致.因此,培养液中添加2.5%FBS、20 μg/L SCF、80 ng/mL GDNF、10 μg/L LIF 对精原干细胞的增殖有利.