牛精原干细胞的分离和纯化及体外培养的一般特性

• 作者: 张仕强 张涌 彭树英 李吉霞 毕聪明
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 精原干细胞 分离 体外培养 牛
• 年，卷（期）: 2006,（10）
• 所属期刊栏目: 遗传繁育
• 页码范围: 977-981
• 页数: 5页
• 分类号: S823.2
• 字数: 3444字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0366-6964.2006.10.006

摘要

采用两步酶消化法制备5月龄的牛生殖细胞悬液,用Percoll不连续密度梯度法分离精原细胞,接种于含10%胎牛血清的DMEM/F12培养基中,37℃,5%CO2饱和湿度培养,观察培养细胞的生长和形态变化.结果5月龄牛的曲细精管主要包含细胞为精原细胞、Sertoli细胞,每克睾丸实质收获生精上皮细胞总数平均为3.18×106个细胞,精原细胞纯化后纯度达69.27%,精原细胞主要分布于27%～35%的Percoll梯度中.牛精原干细胞体外培养6～7 d后开始分裂,20 d后精原干细胞形成小集落.结果表明用两步酶消化、Percoll不连续密度梯度法分离的精原细胞能满足体外培养的需要,可以存活并发生增殖.