山羊精原干细胞的分离纯化及鉴定

• 作者: 刘代艳 包佳婧 吴应积 孔群芳 罗奋华 萨初拉
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 山羊 睾丸 精原干细胞 分离纯化 免疫荧光染色
• 年，卷（期）: 2013,（10）
• 所属期刊栏目: 遗传繁育
• 页码范围: 1554-1560
• 页数: 7页
• 分类号: S827|Q28
• 字数: 5078字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11843/j.issn.0366-6964.2013.10.007

摘要

旨在探究1种简便高效分离纯化山羊精原干细胞的方法.采用三步酶消化对4月龄的山羊睾丸进行处理,分离获得单细胞悬液.将细胞依次培养于明胶、大鼠鼠尾胶原和层粘连蛋白涂层的细胞培养皿中,根据各类细胞贴壁能力和贴壁速度不同进行精原干细胞的富集和纯化,并在各步纯化过程中用精原干细胞特异标记分子PLZF和CDH1进行免疫荧光标记染色鉴定,统计精原干细胞所占的比率,并对获得的细胞进行初步培养和鉴定.每克睾丸中分离出1.36×107个细胞.纯化后每克睾丸组织获得8.7×104个细胞,其中精原干细胞纯度达87.0％.将分离纯化后的细胞在体外培养可形成细胞簇,并表达精原干细胞标记分子CDH1和PLZF.结果表明,通过三步酶消化和差异贴壁方法已经建立起山羊精原干细胞的分离纯化技术.用此技术纯化的山羊精原干细胞(SSCs)能在体外培养增殖,形成细胞簇.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	罗奋华	内蒙古大学哺乳动物生殖生物学与生物技术教育部重点实验室	24	199	6.0	14.0
2	萨初拉	内蒙古大学哺乳动物生殖生物学与生物技术教育部重点实验室	6	10	1.0	3.0
3	刘代艳	内蒙古大学哺乳动物生殖生物学与生物技术教育部重点实验室	4	14	2.0	3.0
4	孔群芳	内蒙古大学哺乳动物生殖生物学与生物技术教育部重点实验室	3	9	1.0	3.0
5	包佳婧	内蒙古大学哺乳动物生殖生物学与生物技术教育部重点实验室	3	9	1.0	3.0