肿瘤相关抗原线粒体蛋白12基因的RNA干扰对HeLa细胞的抑制作用

• 作者: 丁永霞 张勇 张惠珍 沈天伟 王树军 王颖 葛海良 葛瑜 金姝
• 来源期刊: 中国肿瘤生物治疗杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 肿瘤相关抗原线粒体蛋白12基因 siRNA HeLa细胞 线粒体 凋亡
• 年，卷（期）: 2007,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 511-515
• 页数: 5页
• 分类号: R737.33
• 字数: 4184字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3872/j.issn.1007-385X.2007.06.003

摘要

目的:探讨肿瘤相关抗原线粒体蛋白质12基因(tumor-associated antigen mitochondrial protein 12 gene,TAMP12)表达变化对人宫颈癌HeLa细胞的抑制作用.方法:利用计算机辅助设计并化学合成3对针对TAMP12的siRNA片段,通过脂质体法将siRNA转染于TAMP12高表达的HeLa细胞中,筛选有效的siRNA片段.以RT-PCR、实时定量PCR及流式细胞术(FCM)检测肿瘤细胞TAMP12 mRNA及蛋白表达的变化.以激光扫描共聚焦显微镜(confocal lyser scarning microscope,CLSM)观察双色荧光标记蛋白的亚细胞定位和定量表达.以3H-TdR掺入实验和FCM检测阻断TAMP12基因表达对HeLa细胞增殖和凋亡的影响.结果:CLSM检测显示TAMP12蛋白主要表达在HeLa细胞线粒体中.转染siRNA-TAMP12的肿瘤细胞中TAMP12 mRNA及蛋白的表达显著降低,与对照组对比,抑制率分别为81%和87%(P<0.01);转染细胞的DNA合成受抑制,抑制率达42%(P<0.01);转染siRNA-TAMP12肿瘤细胞的凋亡率由对照细胞的8.14%上升到15.59%(P<0.01).结论:RNA干扰可阻断TAMP12基因的表达,从而对人宫颈癌Hela细胞产生抑制作用.