摘要:
为进一步提高稗草生防潜力菌禾长蠕孢菌(Helminthosporium gramineum Rabenh f.sp.echinochloae,HGE)的杀草活性,采用紫外诱变的方法对该菌种进行改良,经筛选获得l株适合液体发酵的突变菌株M1.与出发菌株HGE菌落墨绿色相比,突变株M1菌落呈灰白色至白色,表现出明显差异,并且M1生长速度快,其发酵液对稗草(Echinochloa crusgalli(L.)Beauv)根芽的抑制效果均优于出发菌株HGE.连续7次传代培养发现M1仍具有良好的遗传稳定性.采用RAPD-PCR方法对出发菌株和突变菌株M1同时进行PCR扩增,结果表明,突变菌株的遗传物质已经发生了改变.同时对其液体发酵工艺进行了研究,初步确定了最佳发酵工艺.所用培养基马铃薯200 g/L,葡萄糖30 g/L,麸皮20 g/L,酵母膏1 g/L,KH2PO4 2 g/L,MgSO4·7H2O 1g/L,初始pH 7,发酵温度24℃和150 r/min振荡培养6 d的发酵方案,突变菌株M1菌丝体产量最高,达14.37 g/L.液体培养获得毒素的最佳发酵工艺为培养基蔗糖30 g/L,(NH4))2C4H4O6 5 g/L,NH4NO3 l g/L,酵母膏1 g/L,KH2PO4 1 g/L,MgSO4·7H2O 0.5 g/L,NaCl 0.1 g/L,CaCl2 0.1 g/L,水解酪蛋白0.5 g/L;初始pH 7.25,发酵温度为24℃和静置培养14 d.