猪生殖与呼吸综合征病毒5'非翻译区序列的反向遗传操作

• 作者: 姚火春 孙志 王金勇 袁世山 高飞
• 来源期刊: 中国兽医科学
• 学科: 农学
• 关键词: 猪生殖与呼吸综合征病毒 感染性克隆 体外转录 转染 RNA印迹
• 年，卷（期）: 2007,（8）
• 所属期刊栏目: 病原生物学
• 页码范围: 655-660
• 页数: 6页
• 分类号: S852.659.6
• 字数: 5214字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-4696.2007.08.005

摘要

以猪生殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)北美株感染性克隆pCBC2为平台进行反向遗传操作,利用突变PCR获得在病毒基因组5'非编码区(5'UTR)和ORF1起始密码子之间插入Nde Ⅰ的全长克隆pTLNd4,并以此为基础将5'UTR替换为欧洲株的5'UTR,获得全长克隆pTLV8.以体外转录的RNA转染MARC-145细胞.结果显示,pTLNd4产生了细胞病变(CPE),而pTLV8未产生.通过RT-PCR和Northern blot试验,分别对这2株突变病毒的基因组RNA复制和亚基因组mRNA转录水平进行了分析,同时还对pTLNd4进行了病毒学试验.证实,它们与亲本病毒无论从分子生物学水平或病毒学水平都无明显差异;pTLV8虽未产生CPE,但在病毒传代细胞中检测到了基因组RNA,说明替换不同基因型5'UTR的突变病毒虽然丧失了复制能力和感染性,但仍然能够提供病毒RNA合成所需要的顺式调控因子.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	姚火春	南京农业大学动物医学院	90	614	11.0	23.0