猪链球菌2型二肽酶Ⅳ的克隆、表达及酶活性鉴定

• 作者: 唐家琪 季红峰 朱进 潘秀珍 王长军 郑峰
• 来源期刊: 临床检验杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 猪链球菌 dppⅣ 克隆 酶活性
• 年，卷（期）: 2007,（6）
• 所属期刊栏目: 研究生园地
• 页码范围: 438-440
• 页数: 3页
• 分类号: R446.1
• 字数: 2675字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-764X.2007.06.014

摘要

目的 克隆表达猪链球菌2型二肽酶Ⅳ(DPPⅣ)编码基因,分析表达产物的免疫原性,并测定其酶活性.方法 采用PCR法,从四川资阳中毒性休克综合征病人分离株05ZYH33基因组扩增DPPⅣ的编码基因dppⅣ,构建重组表达质粒pET32a-dppⅣ,转化E. coli BL21(DE3),筛选阳性转化子进行IPTG诱导表达,产物通过SDS-PAGE鉴定,并用western blot检测其抗原活性;最后对表达产物进行亲和层析纯化,测定其在不同pH、温度下的酶活性.结果 dppⅣ基因在原核细胞中得到高效表达,在最适温度和pH下具有最强酶活性.结论 我国猪链球菌2型毒力株 05ZYH33含有dppⅣ基因,在原核系统高效表达的重组蛋白具有良好的免疫原性和酶活性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王长军		134	625	12.0	17.0
2	潘秀珍	南京师范大学生命科学学院	80	452	10.0	17.0
4	唐家琪		103	711	14.0	22.0
5	朱进		66	357	9.0	16.0
8	郑峰		26	98	6.0	8.0
9	季红峰	南京师范大学生命科学学院	2	4	1.0	2.0