长春花萜类吲哚生物碱生物合成途径中重要酶(DXR、SLS、G10H、STR)基因的克隆与表达

• 作者: Thomas Rausch 安志刚 祖元刚 赵博 韩梅
• 来源期刊: 植物研究
• 学科: 生物学
• 关键词: 长春花 萜类吲哚生物碱 生物合成途径 Gateway克隆
• 年，卷（期）: 2007,（5）
• 页码范围: 564-568
• 页数: 5页
• 分类号: Q94
• 字数: 3034字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-5102.2007.05.013

摘要

以分离提取的2周龄长春花植物幼苗总RNA为模板,经两步Gateway-PCR反应扩增得到长春花萜类吲哚生物碱合成途径中编码重要酶:5-磷酸脱氧木酮糖还原酶(DXR)、次番木鳖苷合成酶(SLS)、栊牛儿醇-10羟化酶(G10H)和异胡豆苷合成酶(STR)的cDNA基因片段.利用BP重组酶将扩增片段克隆到Gateway化的入门载体pDONR201中,并进行测序验证.测序后的基因通过LR重组酶的作用转移到带有HIS标签的目标载体pETG10A中,构成重组表达质粒,转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导得到了高效表达,通过Ni-TED树脂纯化方法得到了高纯度的蛋白.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	祖元刚	东北林业大学森林植物生态学教育部重点实验室	424	7591	41.0	63.0
2	韩梅	东北林业大学森林植物生态学教育部重点实验室	5	91	5.0	5.0
3	赵博	东北林业大学森林植物生态学教育部重点实验室	21	134	7.0	11.0
4	安志刚	东北林业大学森林植物生态学教育部重点实验室	11	137	5.0	11.0
5	Thomas Rausch	海德堡大学植物学研究所	1	21	1.0	1.0