三明治构型大鼠原代肝细胞长期培养及生物学特性的研究

• 作者: 孙家邦 宋茂民 张先杰 段钟平 王莹 罗艳侠 郭秀花 陈煜
• 来源期刊: 首都医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 三明治构型 肝细胞 原代培养
• 年，卷（期）: 2007,（1）
• 所属期刊栏目: 普通外科学研究
• 页码范围: 1-6
• 页数: 6页
• 分类号: R3
• 字数: 4961字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1006-7795.2007.01.002

摘要

目的 观察三明治构型大鼠原代肝细胞长期培养的形态学变化,并对其功能进行测定.方法 采用改良原位2步法门静脉胶原酶灌注分离单肝细胞,台盼蓝拒染实验观察细胞活力,利用三明治培养构型培养成年大鼠原代肝细胞,倒置显微镜下连续观察肝细胞的形态学变化,定期收集培养细胞上清液,检测培养肝细胞的分泌及合成功能,并与单层胶原培养肝细胞比较.结果 平均每个鼠肝可获取2×108～3×108个肝细胞,活率在(93±3)%;体外肝细胞培养第3天,清蛋白分泌功能、尿素合成能力恢复到最佳状态.三明治构型培养的肝细胞清蛋白分泌功能、尿素合成能力在培养的14 d内始终维持较高的水平,并形成肝索样结构,伴胆小管网络形成,肝细胞形态维持达28 d以上.结论 三明治构型肝细胞培养体系更接近于肝细胞体内生长环境,肝细胞可在较长时间内保持良好的形态结构和功能,三明治构型不仅可以应用于肝细胞的基础研究,而且为肝细胞移植和生物人工肝治疗肝衰竭奠定了一定的基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	段钟平	首都医科大学附属北京佑安医院人工肝中心	263	1415	17.0	23.0
2	陈煜	首都医科大学附属北京佑安医院人工肝中心	165	973	16.0	21.0
3	郭秀花	首都医科大学公共卫生与家庭医学学院	142	1143	18.0	27.0
4	孙家邦	首都医科大学宣武医院普通外科	163	1526	18.0	31.0
5	宋茂民	首都医科大学附属北京天坛医院普通外科	99	598	14.0	20.0
6	罗艳侠	首都医科大学公共卫生与家庭医学学院	54	451	12.0	19.0
7	王莹	首都医科大学附属北京天坛医院普通外科	59	261	8.0	13.0
8	张先杰	首都医科大学附属北京天坛医院普通外科	15	75	5.0	8.0