2个表达单元间相互位置和转录方向对表达的影响

• 作者: 俞炜源 孙志伟 安怀杰
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 生物学
• 关键词: 表达载体 表达盒 转录方向
• 年，卷（期）: 2007,（3）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 377-380
• 页数: 4页
• 分类号: Q75|Q78
• 字数: 3487字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2007.03.005

摘要

目的:研究质粒表达载体中2个表达单元间相互位置和转录方向关系对表达的影响,找出利于2个表达单元表达的优化的相互关系.方法:以全抗体为研究对象,构建了轻重链方向不同的2种相互关系的单质粒表达载体pIRESdhfrA和pIRESdhfrB,转染CHO-dhfr-细胞后,对瞬时表达水平进行了比较.以pIRESdhfrA和pIRESdhfrB为基础,构建了瞬时表达载体pIRESdhfrA-sv40ori和pIRESdhfrB-sv40ori,在COS-7细胞中进行了瞬时表达水平的比较.构建了基于CHO定点细胞系的稳定表达细胞株,对pIRESdhfrA和pIRESdhfrB进行稳定表达水平的比较.结果:在CHO-dhfr-的瞬时表达水平比较中,pIRESdhfrB转染的细胞表达水平是pIRESdhfrA转染细胞的2.18倍.与pIRESdhfrA-sv40ori在COS-7细胞的瞬时表达水平相比,pIRESdhfrB-sv40ori是其表达水平的2.3倍.pIRESdhfrB-FRT构建的CHO定点细胞平均表达水平是pIRESdhfrA-FRT构建的CHO定点细胞的11.6倍.结论:在构建的真核细胞质粒表达载体pIRESdhfr中,2个表达盒的启动子头-头转录方向关系比头-尾方向关系更利于重组蛋白的表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	俞炜源	军事医学科学院生物工程研究所	87	518	11.0	17.0
2	孙志伟	军事医学科学院生物工程研究所	68	390	10.0	16.0
3	安怀杰	军事医学科学院生物工程研究所	5	16	2.0	3.0