hTERT启动子调控腺病毒介导的HSV-tk/GCV基因系统治疗前列腺癌的实验研究

• 作者: 吴建辉 张勇 王亮 田大伟 蔡文清 连文峰 黎玮 齐进春
• 来源期刊: 中华泌尿外科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 人端粒酶逆转录酶 前列腺肿瘤 基因治疗 腺病毒科
• 年，卷（期）: 2007,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 34-37
• 页数: 4页
• 分类号: R73
• 字数: 2603字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j:issn:1000-6702.2007.01.009

摘要

目的 探讨人端粒酶逆转录酶启动子(hTERT)驱动的重组腺病毒Ad-hTERT HSV-tk 结合环氧鸟苷(GCV)对人前列腺癌的治疗作用.方法 ①体外实验:用携带启动子hTERT的重组腺病毒Ad-hTERT-EGFP以及携带小鼠巨细胞病毒(CMV)启动子的重组腺病毒Ad-CMV-EGFP分别感染人前列腺癌细胞LNCaP及人正常成纤维细胞MRC-5,根据报告基因EGFP表达的不同计算病毒的细胞转染率.MTT法评估GCV对分别感染Ad-hTERT-EGFP、Ad-CMV-EGFP、Ad-hTERTHSV-tk和Ad-CMV-HSV-tk的MRC-5细胞及LNCaP细胞的杀伤作用.②体内实验:建立人前列腺癌BALB/C裸鼠移植瘤模型,将成瘤裸鼠按随机表法分为4组,每组10只.A组为治疗组,肿瘤局部注射1.0×109 PFU/ml的Ad-hTERT-HSV-tk病毒上清0.1 ml,第1、5、10天各1次,第2～15天腹腔注射GCV 100 mg·kg-1·d-1;B组为Ad-hTERT-HSV-tk对照组,注射Ad-hTERT-HSV-tk同A组,第2～15天腹腔注射PBS;C组为GCV对照组,肿瘤局部仅注射PBS 0.1 m;,第1、5、10天各1次,注射GCV同A组;D组为阴性对照组.比较各组肿瘤体积、瘤重及肿瘤抑制率.结果 ①体外实验:当感染复数(MOI)=10时,Ad-CMV-EGFP在MRC-5及LNCaP中的转染率分别为88.41%及90.23%,二者比较差异无统计学意义(P＞0.05),而Ad-hTERT-EGFP在MRC 5及LNCaP中的转染率分别为0及66.67%,二者比较差异有统计学意义(P＜0.01).MOI=100,GCV=1000 μg/ml时,Ad-hTERT-EGFP、Ad-CMV-EGFP、Ad-hTERT-HSV-tk和Ad-CMV-HSV-tk对MRC-5细胞的抑制率分别为0、0、1.1%和98.4%,对LNCaP细胞的抑制率分别为0、0、97.4%和99.4%.②体内实验:荷瘤裸鼠治疗后第14天,A、B、C和D组肿瘤体积分别为82.56、132.85、1 35.03和174.07 mm3;各组移植瘤重量分别为(0.49±0.22)、(1.17±0.18)、(1.35±0.19)和(1.46±0.13)g;A组的肿瘤体积和重量明显小于其它组(P＜0.01).第21天时,各组的移植瘤抑制率分别为72.55%、2.49%、12.28%和0,A组的移植瘤抑制率明显大于其它组(P＜ 0.01).结论 Ad-hTERT-HSV-tk对LNCaP细胞具有靶向杀伤作用,对MRC-5无明显杀伤作用;Ad-hTERT-HSV-tk/GCV系统对人前列腺癌裸鼠移植瘤模型具有明确的治疗作用.