GSB中药血清对rMSCs定向诱导分化为成骨细胞的影响

• 作者: 付林 吴清平 李海燕 桂耀庭 罗国春 肖建德 阎德文
• 来源期刊: 中国骨质疏松杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 含药血清 间充质干细胞 成骨细胞 分化
• 年，卷（期）: 2007,（7）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 480-485
• 页数: 6页
• 分类号: R2
• 字数: 5038字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1006-7108.2007.07.004

摘要

目的 观察GSB中药血清对大鼠MSCs定向诱导分化成骨的影响.方法 将培养的rMSCs分为对照组(C组)[含10%胎牛血清,100 U/ml青霉素和100 μg/ml链霉素的完全培养液]、诱导组(0组)[完全培养液,加诱导培养液(0.1 μmol/L地塞米松、10 mmol/L β-甘油磷酸钠及50 μg/ml维生素C),加20%空白血清]和含药血清诱导组(G组)[完全培养液加诱导培养液诱导培养液中加入20%含药血清).显微镜下观察细胞形态变化,生化法测定上清中Ca2+浓度,Gomon改良钙钴法进行ALP染色,Yon Kossa法进行矿化结节染色,RT-PCR法测定Ⅰ型胶原(COLL1)和脂蛋白脂酶(LPL)的表达,放免法测定上清中骨钙素含量.结果 0组和G组在加入诱导培养液3～4天后梭形细胞比例减少,细胞变形成多角形、乃至方形,部分区域细胞成多层生长;改良Gomori钙钻法碱性磷酸酶染色阳性细胞,Von Kassa 染色发现钙盐沉积;培养9 d后细胞Ca2+浓度开始升高,并随时间持续显著增长,且G组明显高于O组.自第15 d后,O组和G组细胞ALP活性随时间延长而明显增高,且G组显著高于O组;培养的第14 d,G组骨钙素分泌量明显高于O组.成骨诱导剂作用MSCs 12 d后,COLL I mRNA表达阳性.LPL mRNA表达阴性,且G组比O组COIL I mRNA表达更强.结论 补肾填精中药GSB促进骨钙素分泌、增强ALP活性、促钙盐沉积,具有增强成骨诱导剂诱导rMSCs向成骨细胞分化,并促进成骨细胞成熟作用.