Mer基因过表达对内皮细胞株HMEC-1细胞血管形成的影响及其机制探讨

• 作者: 周梦云 沈飞 范磊 谢丽倩 阮长耿
• 来源期刊: 中华血液学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 基因,Mer 受体酪氨酸激酶 血管新生 细胞系,HMEC-1 内皮生长因子 受体,内皮生长因子
• 年，卷（期）: 2007,（9）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 602-604
• 页数: 3页
• 分类号: R5
• 字数: 2263字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j.issn:0253-2727.2007.09.008

摘要

目的 探讨受体酪氨酸家族成员Mer基因对体外血管形成过程的影响及其具体作用机制.方法 利用脂质体法将人全长Mer基因真核表达质粒转染到内皮细胞株HMEC-1细胞中,G418筛选转染细胞得到阳性克隆,利用PCR和Western blot分别在mRNA和蛋白水平验证转染情况.利用Transwell和Matrigel分别观察Mer基因过表达对于内皮细胞迁移能力和血管形成能力的影响.通过荧光定量PCR筛选血管内皮生长因子(VEGF)-A、VEGF-B、VEGF-C、VEGF-D以及血管内皮生长因子受体(VEGFR)-1、VEGFR-2基因的表达情况.结果 经过G418筛选后,PCR和Western blot检测结果显示Mer基因在阳性克隆细胞中有较高水平表达,分别较空质粒对照组上升3.61倍和2.12倍;高表达Mer的HMEC-1细胞迁移能力[迁移到Transwell下室壁的细胞为(21±6)/视野]较对照组[(36±11)/视野]明显下降.体外血管形成实验也表明高表达Mer基因的HMEC-1细胞血管形成能力明显下降,抑制率为76.9%;荧光定量PCR结果显示VEGF-C和VEGFR-2表达明显下降,VEGF-C表达量为对照组的44.7%,VEGF-C表达为对照组的25.6%.结论 Mer过表达可以显著抑制HEMC-1细胞的迁移能力和血管形成能力,并且可能是通过VEGF-C/VEGFR-2信号途径发挥作用.