嗜线虫致病杆菌CB6菌株胞内外杀虫蛋白的纯化及比较研究

• 作者: 刘峥 杨保军 杨怀文 杨秀芬 袁京京 邱德文
• 来源期刊: 中国农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 嗜线虫致病杆菌 胞外杀虫蛋白 胞内杀虫蛋白 纯化 比较
• 年，卷（期）: 2007,（10）
• 所属期刊栏目: 植物保护
• 页码范围: 2227-2233
• 页数: 7页
• 分类号: S4
• 字数: 4901字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0578-1752.2007.10.015

摘要

[目的]分离和纯化嗜线虫致病杆菌北京变种(Xenorhabdus nematophila var. pekingensis)CB6菌株胞内和胞外杀虫蛋白,鉴定其蛋白种类.为进一步利用此类杀虫蛋白奠定基础.[方法]采用硫酸铵沉淀、DEAE Sepharose FF离子交换柱层析、Butyl Sepharose FF疏水柱层析和Sephacryl S-200 HR凝胶过滤对该类蛋白进行分离和纯化,采用Native-PAGE和SDS-PAGE技术对所纯化蛋白进行组分分析.[结果]获得达电泳纯的胞内杀虫蛋白E1和胞外杀虫蛋白E2.以2.58 μg·ml-1含量E1、以4.21 μg·ml-1含量E2喂饲棉铃虫初孵幼虫,对幼虫的生长抑制率分别达62.63%和97.9%.E1、E2经相同纯化参数处理获得的洗脱图相似,经native-PAGE和SDS-PAGE呈现出相似的单带电泳图谱.SDS-PAGE测得E1、E2表观分子量大于212 kD,该杀虫蛋白在60℃仍表现出较强的活性.电泳染色结果表明该类蛋白非糖蛋白也非酯蛋白.[结论]CB6菌株胞内杀虫蛋白E1和胞外杀虫蛋白E2可能是同一种(类)蛋白.