荧光多聚酶链反应测定线粒体乙醛脱氢酶-2 Glu504Lys多态性

• 作者: 刘元明 杨晓莉 梁立武 焦小杰 王发强 王海燕 胡红焱
• 来源期刊: 中华检验医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 聚合酶链反应 线粒体乙醛脱氢酶-2 多态性,单核苷酸
• 年，卷（期）: 2007,（4）
• 所属期刊栏目: 基础实验诊断研究
• 页码范围: 451-455
• 页数: 5页
• 分类号: R4
• 字数: 4948字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j.issn:1009-9158.2007.04.025

摘要

目的 建立一种荧光多聚酶链反应测定线粒体乙醛脱氢酶-2 Glu504Lys多态性的方法.方法 以水解探针技术(TaqMan)为基础,设计相应的引物和荧光探针,PCR反应的Mg2+浓度和探针浓度进行优化,同时对本方法的灵敏度和精密度进行了研究,通过PCR产物直接测序对准确度进行评价.结果 优化后的Mg2+和探针浓度分别为2.5 mmol/L和1.0 μmol/L,批内循环阈值(Ct)值的变异系数为1.38%(n=20),批间Ct值的变异系数为1.48%(n=20);在25 μl反应体系中,人基因组DNA在5.0×102～5.0×106 pg浓度范围内可以得到满意的结果.本法确定150份标本的基因型与PCR产物直接测序法比较,结果完全一致.结论 本方法快速、灵敏、可靠,适合于临床实验室和大规模测定线粒体乙醛脱氢酶-2Glu504Lys多态性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	梁立武	武警总医院检验科	47	290	10.0	15.0
2	刘元明	武警总医院检验科	36	116	7.0	9.0
3	王发强	武警总医院检验科	62	472	12.0	19.0
4	杨晓莉	武警总医院检验科	48	160	6.0	10.0
5	王海燕	武警总医院检验科	66	315	10.0	15.0
6	胡红焱	武警总医院检验科	31	114	5.0	9.0
7	焦小杰	武警总医院检验科	19	88	5.0	8.0