外周血单个核细胞来源树突状细胞分泌细胞因子在过敏性紫癜急性期的变化

• 作者: 张秋业 王娟 董增义 陈永兴
• 来源期刊: 中国组织工程研究与临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 过敏性紫癜 树突状细胞 白细胞介素 干扰素γ 儿童
• 年，卷（期）: 2007,（37）
• 所属期刊栏目: 细胞工程相关实验
• 页码范围: 7417-7420
• 页数: 4页
• 分类号: R394.2
• 字数: 5727字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1673-8225.2007.37.031

摘要

目的:观察外周血单个核细胞来源的树突状细胞分泌白细胞介素水平在过敏性紫癜急性期的变化,分析其与Th亚群平衡的相关性.方法:实验于2006-10/2007-12在青岛大学医学院附属医院儿科研究所完成.①实验对象:取急性期过敏性紫癜患儿外周静脉血28份作为过敏性紫癜组,平均年龄7.53岁;以门诊体检的健康同龄儿童外周静脉血18份作为对照组.儿童家属均知情同意.②实验方法:采血2.0～3.0 mL/份,肝素抗凝,离心移取血浆1 mL冻存备测.采用密度梯度离心法获取外周血单个核细胞,调整细胞悬液浓度为2×109 L-1,接种于24孔板向树突状细胞进行诱导培养.每孔加入含终浓度1 000 u/mL重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子、500 u/mL重组人白细胞介素4的RPMI-1640完全培养液1 mL,隔日添加1/2首次浓度的上述两种细胞因子,半量换液.培养至第6天,每孔加入重组人肿瘤坏死因子α至终浓度200 u/mL.③实验评估:倒置显微镜观察树突状细胞的生长情况,以流式细胞仪检测成熟树突状细胞特异性表面分子CD83的表达率.采用ELISA法检测血浆干扰素γ、白细胞介素4的水平及培养上清中的白细胞介素10,12,18水平.结果:①树突状细胞体外诱导培养过程的形态学观察:外周血单个核细胞贴壁3 h后获得黏附细胞,加入细胞因子24 h后可见悬浮细胞增多,并呈细胞聚集现象,培养至第8天可见到大量具有毛刺状或根须状突起的悬浮细胞,即为树突状细胞.②树突状细胞的表型鉴定:过敏性紫癜组及对照组树突状细胞表面分子CD83均呈高表达,表达率分别为(69.29±1620)%,(69.26±18.77)%.③Th亚群变化:与对照组比较,过敏性紫癜组白细胞介素4水平明显升高(t'=5.09,P＜0.01),干扰素γ、干扰素γ/白细胞介素4水平均明显降低(t=4.26,P＜0.01;t'=7.98,P＜0.01).④树突状细胞分泌细胞因子的水平:与对照组比较,过敏性紫癜组树突状细胞白细胞介素12水平明显降低(t=2.53,P＜0.05),白细胞介素10,18水平均明显升高(t=2.07,P＜0.05:t=2.10,P＜0.05).⑤树突状细胞分泌细胞因子水平与Th亚群平衡相关性分析:两组树突状细胞分泌白细胞介素12水平均与干扰素γ水平呈显著正相关(r=0.56～0.62,P均＜0.01),与干扰素γ/白细胞介素4值呈正相关(r=0.51～0.52,P＜0.01或0.05).两组白细胞介素10,18水平均与白细胞介素4水平呈显著正相关(r=0.85～0.68,P均＜0.01),与干扰素γ/白细胞介素4值呈负相关(r=-0.75-0.49,P＜0.01或0.05).结论:过敏性紫癜患儿分泌白细胞介素12水平不足,而分泌白细胞介素10,18水平升高,提示过敏性紫癜患儿存在树突状细胞功能紊乱,且与Th1/Th2失衡关系密切.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张秋业	青岛大学医学院附属医院儿科	108	629	13.0	20.0
2	董增义	青岛大学医学院附属医院儿科	43	234	8.0	13.0
3	王娟	青岛大学医学院附属医院儿科	37	240	8.0	14.0
4	陈永兴	青岛大学医学院附属医院儿科	6	36	4.0	6.0