自动工作站提取基因组DNA方法的建立及其在HLA基因分型中的应用

• 作者: 唐斯 李桢 王大明 邓志辉 邹红岩
• 来源期刊: 现代检验医学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 自动TECAN基因工作站 基因组DNA 提取 全血样本
• 年，卷（期）: 2007,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1-3
• 页数: 3页
• 分类号: Q781
• 字数: 2160字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-7414.2007.03.001

摘要

目的 研究和建立从大量全血标本中提取基因组DNA的有效方法 ,以应用于Luminex HLA流式磁珠基因分型.方法 使用自动工作站(瑞士TECAN公司)从600 μl全血中提取基因组DNA,提取的DNA样本用紫外分光光度仪测定其浓度和纯度,DNA的完整性用琼脂糖凝胶电泳检测,并统计分析每一DNA样本流式磁珠HLA-A,B和DRB1基因扩增产物经探针分子杂交后的荧光信号强度.结果 从600 μl全血中提取基因组DNA,含量平均为10.052±0.824 μg,样本的A260nm/A280nm值平均为1.821±0.201.琼脂糖电泳法测得DNA的分子量约为21kb,HLA-A,B和DRB1位点PCR产物杂交后的平均荧光信号强度分别为2 183.84±478.12(exon2),2 168.28±338.59(exon3);2 057.27±397.41(exon2),1959.78±283.24(exon3);3 643.38±327.85.结论 此方法适用于从大量全血样本中快速提取基因组DNA,所得基因组DNA适用于高通量HLA流式磁珠基因分型等下游的分子生物学实验.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	邹红岩		49	152	6.0	9.0
2	李桢		43	170	6.0	11.0
3	邓志辉		66	218	7.0	11.0
4	王大明		35	142	6.0	9.0
5	唐斯		10	30	3.0	4.0