肝素酶特异性RNAi对人食管癌移植瘤组织中Hpa基因表达的影响

• 作者: 娄欣 孙淼淼 宋一民 张岚 张红 曹学全 陈奎生 高冬玲
• 来源期刊: 郑州大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 肝素酶 食管肿瘤 癌 EC9706细胞系 裸鼠 RNAi技术
• 年，卷（期）: 2007,（1）
• 所属期刊栏目: 系列研究
• 页码范围: 12-14
• 页数: 3页
• 分类号: R73
• 字数: 1970字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-6825.2007.01.005

摘要

目的:应用RNAi技术沉默肝素酶(heparanase,Hpa)基因,探讨其对人食管癌裸鼠移植瘤组织中Hpa基因表达的影响.方法:①先转染后成瘤:采用浓度为15 μmol/L体外合成的Hpa小分子干扰RNA(siRNA)转染EC9706细胞72 h,另设无关序列组及空白对照组.然后将转染后的EC9706细胞种植于裸鼠皮下构建裸鼠食管癌移植瘤,待瘤体长至足够大时,取瘤组织;②先成瘤后转染:构建裸鼠食管癌移植瘤模型,待肿瘤长出1周后,依每次3 μg/只腹腔注射siRNA及无关序列,连续3 d,另1组仅注射PBS作空白对照,然后取瘤组织.采用免疫组化及原位杂交技术观察各组瘤组织中肝素酶蛋白及mRNA的表达.结果:无论是先转染后成瘤组还是先成瘤后转染组siRNA均可下调裸鼠食管癌移植瘤组织中Hpa蛋白及mRNA的表达,与无关序列组及空白对照组相比,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论:应用RNAi技术沉默Hpa基因可以有效下调裸鼠食管癌移植瘤组织中Hpa蛋白及mRNA的表达,为临床防治食管癌浸润转移奠定了一定的理论基础.