马蹄内翻足大鼠模型踝部骨骼、组织及脊髓蛋白质组学分析

• 作者: 吉士俊 孙开来 富伟能 李增刚 纪虹 赵彦艳 金春莲
• 来源期刊: 中华医学遗传学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 先天性马蹄内翻足 全反式维甲酸 双向电泳 质谱 凋亡
• 年，卷（期）: 2007,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 52-58
• 页数: 7页
• 分类号: R6
• 字数: 5272字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j.issn:1003-9406.2007.01.013

摘要

目的 应用全反式维甲酸(all-trans retinoic acid,ATRA)诱发Wistar大鼠马蹄内翻足模型为实验材料,应用蛋白质学技术探讨先天性马蹄内翻足发病机理.方法 按135 mg/kg体重经口给予孕10天Wistar大鼠ATRA,孕21天剖检胎鼠,提取畸形鼠和对照鼠脊髓、踝部组织(去除皮肤)及踝部骨骼总蛋白,双向电泳分离蛋白,考马斯亮蓝染色,PDQuest软件、质谱及生物信息学分析差异蛋白.应用半定量逆转录PCR检测马蹄内翻足畸形鼠和对照鼠脊髓、踝部骨骼和胫骨后肌群组织xiap、col2α1、tnnt1和ngfr基因表达.应用免疫组化染色检测Xiap蛋白表达.应用TUNEL法进行脊髓、踝部骨骼细胞凋亡检测.结果 经双向电泳发现马蹄内翻足模型胎鼠多种蛋白质表达存在差异,质谱及生物信息学进一步分析发现Ⅱ型胶原蛋白等16种蛋白表达发生改变.逆转录PCR检测进一步证实xiap、col2α1在脊髓、踝部骨骼和胫骨后肌群组织表达下调,tnnt1在踝部骨骼和胫骨后肌群组织表达下调,ngfr在以上组织表达无异常.免疫组化染色进一步证实Xiap蛋白表达下调.神经、骨骼细胞凋亡发生率是对照组细胞凋亡发生率的5.4和10倍.结论 马蹄内翻足大鼠模型踝部组织(去除皮肤)、踝部骨骼及脊髓多种蛋白质存在表达差异.Xiap、Col2α1和sTnT与马蹄内翻足相关,Ngfr与马蹄内翻足无关.ATRA可以诱导脊髓、骨骼凋亡发生率升高,与Xiap表达下调有关,在马蹄内翻足发生过程中发挥重要作用.