地高辛标记探针检测5种葫芦科作物病毒的斑点杂交方法

• 作者: 刘丽锋 古勤生 孟娟 彭斌 李莉 林石明 田延平
• 来源期刊: 中国农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 聚合酶链反应(PCR) 地高辛标记探针 斑点杂交 ZYMV WMV CMV PRSV-W SqMV
• 年，卷（期）: 2007,（12）
• 所属期刊栏目: 植物保护
• 页码范围: 2741-2746
• 页数: 6页
• 分类号: S4
• 字数: 4862字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0578-1752.2007.12.011

摘要

[目的]探索5种葫芦科作物病毒即小西葫芦黄花叶病毒(Zuccini yellow mosaic virus,ZYMV)、西瓜花叶病毒(Watermelon mosaic virus,WMV)、黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus,CMV)、番木瓜环斑病毒西瓜株系(Papaya ringspot virus watermelon strain,PRSV-W)和南瓜花叶病毒(Squash mosaic virus,SqMV)的斑点杂交检测技术,为葫芦科作物种子带毒的快速准确鉴定、流行病学研究和转基因检测等提供技术和方法.[方法]以构建的重组质粒为模板,用PCR方法合成了相应的地高辛标记的cDNA探针.通过斑点杂交检测西葫芦病叶汁液来考察探针的灵敏性和特异性.同时设计了3种不同长度的SqMV探针(0.55、1.6、2.7 kb)对杂交效果进行了研究.[结果]ZYMV、WMV、CMV、PRSV-W和SqMV的5种探针检测各自侵染西葫芦病汁液的稀释低限分别为1:160、1:160、1:320、1:160、1:320,而每种探针与健康西葫芦和其它4种病毒的反应均为阴性.不同长度的SqMV探针杂交结果相同.[结论]用PCR方法合成的地高辛标记的探针,能够直接在植物组织中将5种病毒检测出来,具有较好的灵敏性、特异性和重复性.探针的长度对杂交的灵敏性和特异性没有影响.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李莉	中国农业科学院郑州果树研究所	66	855	15.0	27.0
2	彭斌	中国农业科学院郑州果树研究所	22	162	8.0	12.0
3	古勤生	中国农业科学院郑州果树研究所	60	585	14.0	22.0
4	刘丽锋	中国农业科学院郑州果树研究所	16	102	7.0	10.0
5	田延平	中国农业科学院郑州果树研究所	3	27	2.0	3.0
6	孟娟	中国农业科学院郑州果树研究所	2	16	1.0	2.0
7	林石明		1	16	1.0	1.0