反向斑点杂交法快速检测甘薯羽状斑驳病毒和甘薯G病毒

• 作者: 何新民 何海旺 何虎翼 刘义明 唐洲萍 李丽淑 王晖 谭冠宁
• 来源期刊: 南方农业学报
• 关键词: 甘薯 甘薯羽状斑驳病毒 甘薯G病毒毒 病毒检测 反向斑点杂交技术
• 年，卷（期）: 2014,（1）
• 所属期刊栏目: 植物保护·农业气象
• 页码范围: 43-48
• 页数: 6页
• 分类号: S435.51
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j:issn.2095-1191.2014.1.43

摘要

[目的]以克隆得到的甘薯羽状斑驳病毒(Sweet potato feathery mottle virus,SPFMV)和甘薯G病毒(Sweetpotato virusG,SPVG)基因片段为探针建立反向斑点杂交技术体系,应用于甘薯组培脱毒苗带毒情况检测,为生产优质甘薯组培脱毒苗提供保障.[方法]根据已公布的侵染甘薯的SPFMV和SPVG的核苷酸序列设计两对特异引物,以RT-PCR法从染病的甘薯叶片扩增SPFMV和SPVG的两个片段,并以克隆到的两个病毒片段及内参基因Actin片段为探针建立反向斑点杂交体系.[结果]分别克隆出长度约310和500 bp的片段,经BLAST比对,所获得的310 bp片段为SPFMV的外壳蛋白基因片段,同源性为97％,500 bp片段为SPVG的外壳蛋白基因片段,同源性为99％.分别用带有SPFMV和SPVG片段的重组质粒pUC-SPFMV和pUC-SPVG进行反向斑点杂交,发现不同病毒能获得单一信号,无交叉现象.以染病甘薯和脱毒甘薯苗为样品,用该种病毒的探针进行反向斑点杂交,染病植株样品中能获得单一信号,而脱毒苗甘薯样品未见任何信号,杂交结果与RT-PCR检测结果一致.[结论]用建立的反向斑点杂交技术体系能有效检测甘薯中的SPFMV和SPVG,无交叉信号,可用于甘薯组培脱毒苗的前期检测.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	何虎翼	广西农业科学院经济作物研究所	52	356	11.0	16.0
2	唐洲萍	广西农业科学院经济作物研究所	39	226	9.0	12.0
3	李丽淑	广西农业科学院经济作物研究所	42	257	10.0	13.0
4	何新民	广西农业科学院经济作物研究所	36	277	9.0	14.0
5	谭冠宁	广西农业科学院经济作物研究所	52	292	10.0	13.0
6	刘义明		14	56	4.0	6.0
7	何海旺	广西农业科学院经济作物研究所	34	167	8.0	11.0