甘薯羽状斑驳病毒(SPFMV)和矮化退绿病毒(SPCSV)的双重RT-PCR检测技术体系构建

• 作者: 孟利前 张进 朱建晨 李庞博 肖海峻 黄广学
• 来源期刊: 沈阳农业大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 甘薯 羽状斑驳病毒 矮化退绿病毒 双重RT-PCR 检测技术
• 年，卷（期）: 2018,（6）
• 所属期刊栏目: 研究简报
• 页码范围: 724-729
• 页数: 6页
• 分类号: S432.4.1
• 字数: 4611字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-1700.2018.06.011

摘要

在大田生产中,甘薯极易受到甘薯羽状斑驳病毒(sweet potato feathery mottle virus,SPFMV)和甘薯矮化退绿病毒(sweet potato chlorotic stunt virus,SPCSV)的混合侵染,导致甘薯产量和品质严重下降,因此构建能同时检测SPFMV和SPCSV两种病毒的检测技术体系对甘薯病毒病(sweet potato virus disease,SPVD)的预防具有重要意义.RT-PCR病毒检测技术具有灵敏度高、特异性强的优点.针对SPFMV和SPCSV病毒分别设计4对和3对特异性引物,通过单一RT-PCR检测技术筛选出特异性强的引物和最佳退火温度;在双重RT-PCR检测体系中,针对SPFMV和SPCSV两种病毒的引物浓度组合设置5个处理,优化双重RT-PCR病毒检测技术体系.单一RT-PCR检测结果表明,SPFMVS2/A2和SPCSVS2/A2引物的特异性最强,目的片段大小为461bp,对于SPCSV病毒来说,SPCSVS2/A2引物的特异性最强,目的片段大小为304bp,最佳退火温度为56℃;在双重RT-PCR检测技术体系中,SPFMV/SPCSV的引物组合浓度比为1:3时,目标片段扩增效果最好.对两种病毒最低检测浓度的测试结果表明,SPFMV和SPCSV两种病毒RNA的最低检测浓度相当于模板RNA浓度的10-4μL.双重RT-PCR检测技术体系的构建,为大田生产中受SPFMV和SPCSV共侵染的甘薯病毒病的预防提供技术支持.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	肖海峻		55	299	8.0	16.0
2	孟利前		32	194	5.0	13.0
3	黄广学		35	46	4.0	5.0
4	朱建晨		34	26	3.0	3.0
5	张进		4	2	1.0	1.0
6	李庞博		4	2	1.0	1.0