甘薯羽状斑驳病毒实时荧光定量PCR检测方法的建立

• 作者: 乔奇 张德胜 张振臣 张立军 王丽 王振东 王爽 田雨婷 秦艳红
• 来源期刊: 沈阳农业大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 甘薯羽状斑驳病毒 实时定量PCR 荧光探针
• 年，卷（期）: 2013,（2）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 129-135
• 页数: 7页
• 分类号: S432.41
• 字数: 4532字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-1700.2013.02.001

摘要

依据甘薯羽状斑驳病毒(Sweet potato feathery mottle virus,SPFMV)外壳蛋白(CP)基因的保守区设计引物和TaqMan探针,经过对反应体系和反应条件的优化,建立了特异、灵敏、高效的SPFMV实时荧光定量PCR检测方法.试验结果表明:该方法能检测到目的病毒,标准曲线的斜率和相关系数分别为-3.307和0.998,扩增效率为100.6％.最低可检测到约5.46个拷贝的阳性质粒,灵敏度比常规PCR高2个数量级.建立的实时荧光定量PCR方法可用于田间样品的检测,为SPFMV的早期预警和流行学研究提供了技术手段.