实时荧光定量RT-PCR检测禽白血病病毒方法的建立与应用

• 作者: 凌宗帅 史玉颖 张丽萍 张太翔 张金玲 田国宁 韩亮 高小博
• 来源期刊: 中国兽医杂志
• 关键词: 禽白血病 实时荧光定量RT-PCR Taq Man探针
• 年，卷（期）: 2010,（6）
• 页码范围: 3-6
• 分类号: S852.65+9.3
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0529-6005.2010.06.001

摘要

建立了Taq Man 实时荧光定量RT-PCR方法检测禽白血病病毒(ALV).选取ALV病毒的LTR序列设计引物和探针,以梯度稀释的含有ALV目的扩增片段的质粒作为标准品,进行定量PCR反应以确定检测灵敏度.阳性标准品在3.0×102～3.0×107个拷贝共6个数量级的范围内,定量PCR反应有"S" 型扩增曲线,检测灵敏度最低为30个拷贝.根据病毒拷贝数与定量反应Ct值的关系,绘制了标准曲线.该方法具有特异性,对新城疫病毒、禽流感病毒、传染性支气管炎病毒、传染性囊病病毒、鸡传染性贫血病毒和马立克病病毒核酸都没有扩增反应.实时定量PCR检测ALV的方法,灵敏度高,特异性好,可以进行定量分析,在禽病的快速检测上具有重要意义.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	史玉颖	山东省农业科学院家禽研究所	57	99	5.0	7.0
2	张太翔		28	97	6.0	8.0
3	凌宗帅		27	132	8.0	9.0
4	高小博		5	41	4.0	5.0
5	田国宁		36	107	7.0	8.0
6	张金玲		40	97	6.0	8.0
7	韩亮		14	34	3.0	5.0
8	张丽萍		12	22	2.0	4.0