应用荧光定量RT-PCR检测J亚群禽白血病病毒

• 作者: 尹彦文 屈素洁 张步娴 施开创 李军 胡杰 莫胜兰 邹联斌 陈芳芳
• 来源期刊: 中国动物检疫
• 学科: 农学
• 关键词: J亚群禽白血病病毒 Taqman探针 荧光定量PCR
• 年，卷（期）: 2015,（6）
• 所属期刊栏目: 技 术 支 撑
• 页码范围: 56-59,63
• 页数: 5页
• 分类号: S8562.65+7
• 字数: 3321字
• 语种: 中文

摘要

针对J亚群禽白血病病毒（ALV-J）基因序列保守区域设计一对特异性引物和一条特异性探针，通过构建重组阳性标准质粒作为阳性标准品，建立了检测ALV-J核酸的荧光定量PCR方法。优化反应体系和条件后进行特异性、敏感性、重复性试验。结果显示，该检测方法特异性强，与其它禽源病毒如A亚群禽白血病病毒（ALV-A）、B亚群禽白血病病毒（ALV-B）、新城疫病毒（ NDV）、禽流感病毒（AIV）、鸡传染性贫血病毒（CIAV）和马立克病病毒（MDV）均不发生交叉反应；该方法可检测到3.2×102拷贝/μL的病毒核酸，与常规RT-PCR相比，敏感性高100倍；重复性试验的变异系数小于2%。研究结果表明，建立的Real-time RT-PCR 检测方法特异性强、灵敏度高、可重复性好，可用于ALV-J的定量检测。