BVDV和IBRV双重实时荧光定量PCR检测方法建立

• 作者: 刘梦瑶 吴文学 张秋楠 李金祥
• 来源期刊: 中国兽医杂志
• 关键词: BVDV IBRV 实时荧光定量PCR(qPCR):探针
• 年，卷（期）: 2019,（11）
• 所属期刊栏目: 实验观察
• 页码范围: 28-31,36,中插3
• 页数: 6页
• 分类号: S858.23
• 语种: 中文

摘要

根据牛病毒性腹泻病毒(BVDV)5’端非编码区和牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)gB基因保守区基因序列,参考文献分别合成了2对特异性引物和探针.利用构建的包含BVDV和IBRV目标基因片段的阳性质粒,对退火温度、引物和探针的浓度以及反应条件进行了优化,构建了实时荧光定量PCR(qPCR)标准曲线,并对双重qPCR方法的特异性、敏感性和重复性进行了评价.试验结果显示,qPCR最适退火温度为54.0℃,BVDV引物浓度为0.2μmol/L,IBRV引物浓度为0.3 μmol/L,BVDV探针浓度0.2 μmol/L,IBRV探针浓度为0.1 μmol/L.BVDV的RNA最低检测限为100拷贝/μL,IBRV的DNA最低检测限为1拷贝/μL,并具有良好的特异性和重复性,为BVDV和IBRV的同时、快速、定量检测提供了有效的方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吴文学	中国农业大学动物医学院	29	418	10.0	20.0
2	李金祥		26	168	7.0	12.0
3	刘梦瑶	中国农业大学动物医学院	1	0	0.0	0.0
4	张秋楠	中国农业大学动物医学院	2	7	1.0	2.0