原文服务方: 南方农业学报       
摘要:
[目的]建立SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR检测转基因烟草中外源基因拷贝数的方法,为转基因植物中外源基因拷贝数的检测提供参考.[方法]采用SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR方法,检测转基因烟草中外源绿色荧光蛋白基因(GFP)的拷贝数,以烟草单拷贝的内源核糖核酸还原酶基因(RNR2)作为内参基因,建立相对定量的双标准曲线法检测转基因烟草中外源基因拷贝数的方法.[结果]构建RNR2基因、GFP基因实时荧光定量PCR的标准曲线,分别为y=-0.2858x+5.6695和y=0.2826x+2.1048,R2分别为0.9994和0.9989,相关性较高.在检测的5株转基因烟草中GFP基因的拷贝数分别为5、8、19、28和45,非转基因烟草植株的GFP基因拷贝数为0.[结论]建立的转基因烟草中外源基因SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR检测方法具有简单、快速、准确等优点,可用于基因工程中对优良转化植株的筛选及外源基因表达量的快速检测和定量分析.
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文献信息
篇名 转基因烟草中外源基因实时荧光定量PCR检测方法的建立
来源期刊 南方农业学报 学科
关键词 转基因烟草 双标准曲线法 外源基因 拷贝数 SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR
年,卷(期) 2015,(5) 所属期刊栏目 作物遗传育种·种质资源·分子生物学
研究方向 页码范围 745-749
页数 5页 分类号 Q786
字数 语种 中文
DOI 10.3969/j:issn.2095-1191.2015.5.745
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研究主题发展历程
节点文献
转基因烟草
双标准曲线法
外源基因
拷贝数
SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
南方农业学报
月刊
2095-1191
45-1381/S
大16开
1964-01-01
chi
出版文献量(篇)
7029
总下载数(次)
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总被引数(次)
43586
论文1v1指导