转基因大豆中外源基因的二重PCR检测

• 作者: 李寿崧 江树勋 邵碧英 陈文炳
• 来源期刊: 《福建农林大学学报（自然科学版）》
• 关键词: 大豆 CaMV 35S启动子 CP4 EPSPS基因 二重PCR
• 年，卷（期）: 2005,（4）
• 所属期刊栏目: 生命科学
• 页码范围: 483-487
• 页数: 5页
• 分类号: Q78
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1671-5470.2005.04.018

摘要

用CTAB法提取转基因大豆(Roundup Ready品系)的总DNA.根据行业标准SN/T 1195-2003,合成用于扩增花椰菜花叶病毒(Cauliflower mosaic virus,CaMV)35S启动子的引物S1和S2、根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)CP4菌株EPSPS基因的引物Ea、ER和Eb.应用这5条(2组)引物对转基因大豆进行二重PCR检测时,扩增得到2个新片段,分别与片段S1ER、S1Eb大小一致.将片段S1ER、S1Eb进行克隆并测序,序列已在GenBank上登录,接受号分别为AY592954和AY596948.序列分析结果表明,片段S1ER含有CaMV 35S启动子和矮牵牛叶绿体转运肽序列(CTP)的部分序列,片段S1Eb含有CaMV 35S启动子部分序列、CTP和CP4 EPSPS基因的部分序列,原用于扩增CP4 EPSPS基因的引物中,仅引物Eb位于CP4 EPSPS基因中.重新合成扩增CP4 EPSPS基因的引物E1和E2,建立的二重PCR方法不仅适合于转基因Roundup Ready大豆,还适合于其它植物中的CaMV 35S启动子和CP4 EPSPS基因的同时检测.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	邵碧英		66	789	16.0	24.0
2	陈文炳		56	583	13.0	20.0
3	江树勋		44	488	14.0	20.0
4	李寿崧		41	642	16.0	24.0